實 驗 報 告
生物傳感器 與測試技術
課程名稱 生物傳感器與測試技術 姓 名 徐夢浙學 號 專 業 生物系統工程指導老師 王建平/葉尊忠
一 熱電偶傳感器實驗
一、 實驗目的：
瞭解熱電偶測量温度的原理和調理電路，熟悉調理電路工作方式。
二、 實驗內容：
本實驗主要學習以下幾方面的內容 1. 瞭解熱電偶特性曲線；
2．觀察採集到的熱信號的實時變化情況。 3. 熟悉熱電偶類傳感器調理電路。
三、 實驗儀器、設備和材料：
所需儀器
四、
myDAQ、myboard、nextsense01熱電偶實驗模塊、萬用表
注意事項
五、 在插拔實驗模塊時，儘量做到垂直插拔，避免因為插拔不當而引起的接插件插針彎
曲，影響模塊使用。 六、 禁止彎折實驗模塊表面插針，防止焊錫脱落而影響使用。 七、 更換模塊或插槽前應關閉平台電源。 八、 開始實驗前，認真檢查熱電偶的連接，避免連接錯誤而導致的輸出電壓超量程，否
則會損壞數據採集卡。 九、 本實驗儀採用的電偶為K型熱電偶和J型熱電偶。
十、 實驗原理：
熱電偶是一種半導體感温元件，它是利用半導體的電阻值隨温度變化而顯著變化的特性實現測温。
熱電偶傳感器的工作原理
熱電偶是一種使用最多的温度傳感器，它的原理是基於1821年發現的塞貝克效應，即兩種不同的導體或半導體A或B組成一個迴路，其兩端相互連接，只要兩節點處的温度不同，一端温度為T，另一端温度為T0，則迴路中就有電流產生，見圖50-1（a），即迴路中存在電動勢，該電動勢被稱為熱電勢。
圖50-1（a） 圖50-1（b）兩種不同導體或半導體的組合被稱為熱電偶。
當迴路斷開時，在斷開處a，b之間便有一電動勢ET，其極性和量值與迴路中的熱電勢一致，見圖50-1（b），並規定在冷端，當電流由A流向B時，稱A為正極，B為負極。實驗表明，當ET較小時，熱電勢ET與温度差（T-T0）成正比
十一、 實驗步驟：
十二、 關閉平台電源（myboard），插上熱電偶實驗模塊。開啟平台電源，此時可以看到
模塊左上角電源指示燈亮。
十三、 打開nextpad,運行熱電偶實驗應用程序
十四、 查看傳感器介紹，瞭解熱電偶的原理及温差與熱電勢之間的關係。
十五、 在特性曲線頁面。選擇不同型號的熱電偶觀察各型號熱電偶的V-T，在測温曲線的
下方，手動模擬產生熱電勢的值，觀察測温曲線。
十六、 在實驗內容頁面中瞭解實驗的內容、操作方式和過程
十七、 在仿真頁面任意改變運算放大器的輸出電壓值和運算放大倍數，記錄E（T,T0）和
冷端温度仿真的輸出值E（T0），將數據填寫到熱電偶温度手動測量表中，查表計算熱電偶的電勢所對應的温度值。 十八、 在測量頁面
十九、 選擇實際接入的電阻
二十、 在nextsense01中，用杜邦線將R2 R4鏈接到運算放大器上。
二十一、 調零。將A、B端用杜邦線短接，調節模塊右側下方的電位器，對放大器的輸
出Vout進行調零。 二十二、 測量。選擇K型或者J型熱電偶其中一個，連接到A、B兩端，在自動測量頁
面，點擊頁面上的開始按鈕進行數據的採集和記錄，將熱電偶放置到熱水中記錄温度的變化（温度變化範圍至少30度）。 二十三、 在nextpad頁面中，點擊頁面右上的數據保存按鈕，選擇保存的表格，進行數
據的保存。
二十四、 數據及結論（繪製數據點散圖，建立迴歸方程，分析靈敏度和線性誤差）
冷場温度 熱電偶輸出電勢（uV） 20.64 3543.21 20.65 3500.6 20.65 3731.66 20.65 3730.34 20.64 3797.56
測量點温度
87.59 86.81 91.08 91.06 92.3
温度差 66.95 66.16 70.43 70.41 71.66
20.64 20.65 20.65 20.65 20.64 20.65 20.65 20.66 20.66 20.65 20.66 20.65 20.66 20.64 20.66 3815.1 3561.15 3491.3 3509.37 3463.48 3472.74 3514.91 3535.65 3585.15 3601.62 3544.6 3443.76 3421.89 3410.39 3461.66 92.62 87.93 86.63 86.97 86.11 86.29 87.07 87.46 88.38 88.68 87.63 85.76 85.36 85.13 86.1
71.98 67.28 65.98 66.32 65.47 65.64 66.42 66.8 67.72 68.03 66.97 65.11 64.7 64.49 65.44
結論：
實驗表明，當ET較小時，熱電勢ET與温度差（T-T0）成正比，被測傳感器的比例係數為54.020。根據半導體的電阻值隨温度變化而顯著且有規律變化的這一特性，可以實現測温功能。
篇二：大學生物實驗論文要領
白色背景
題目：用短語，不用句子：……的研究，不要用學科題目作標題；英文：A study of…… 通訊作者：BOSS，支持者
摘要：目的、方法、結果、結論。不宜舉例，不用引文。英文摘要調整一下，符合英文順序。關鍵詞：分子式、化學式不作為關鍵詞，要寫全名。常規技術不做關鍵詞如離心，英文關鍵詞用,隔開
前言：常見的引言包括以下內容：
1 提出課題的現實情況和背景；
2説明課題的性質、範疇及其重要性，突出研究的目的或者需要解決的問題；
3 前人研究成果及其評價；
4 達到研究目的的研究方法和實（試）驗設備；
5 研究工作的新發現。
研究背景理論依據（XX是什麼，研究進展，實驗原理包括方法原理、實驗對象原理即為什麼選這兩個對象，有無關聯，判斷原理的依據）、研究目的（要解決什麼問題）、研究方法（怎樣研究）400-500字左右，文獻綜述包括在前言裏。
寫前人……本研究……希望得到……的結果
材料：寫主要的，例如樹脂，Tris，其他就寫國產分析純，如NaCl，燒杯、試管不寫
方法：眾所周知的方法不寫，如離心。寫出方法名字，註明參考文獻，重點寫改進方法。例如：提取效果為……的電泳進行檢測
結果：比例尺、圖標、放大倍數；不進行評論評價分析討論，實驗結果不要原始濃度，電泳的各個泳道是什麼一定要寫出來。洗脱圖自己重新做一個，標註單位。柱層析的峯要寫標號，註明是什麼蛋白。
結論：實驗表面結果，反映了什麼現象。相同因素之間，不同因素之間。方法怎麼樣。 討論：得到這樣結果的可能原因，原因大小程度。建議、改進可放分析討論。1討論為什麼會出現這樣的結果出現意味了什麼？用理論解釋。2比較與前人異同（異：解釋差異；同：更加證明）3研究有什麼新發現，可能的原因4實驗的不足
其他：同一結果圖表不共存，如果圖不能直接説明可以附上表，圖上無多餘的線，違反總體趨勢的個別點可以去掉。折線圖橫軸按實驗進行順序編寫。小數點位數保持一致。 （適用於細胞生物學及植物生理學）
微生物及生物化學有待補充。。。
致謝：協助、資金支持，200字
生化海報：IgG與別人標準進行比較，pro標準曲線不過0點，標準pro只有280nm，幾個樣都要算。
圖名稱包括：方法、目的、對象
電泳：上樣順序、其他分子量、marker分子量、分析趨勢（遷移率一般達不到0.999） 紫外：峯1，峯2，那個是我們的
寫分析不寫説明，與其他步驟聯繫起來，層析與電泳聯繫起來説明
分析：最後有結論，濃度、回收率提取出來，圖有序列關係，按實驗進行順序
海報一般是豎的，存PDF或圖片
分析討論對結果討論，對別人展示好的一面，不是注意事項
要有説明，表名稱，要有整體聯繫性。
篇三：大連理工大學 生化實驗報告——模版(新)
小牛腸鹼性磷酸酶的提取及酶活測定、
考馬斯亮藍法測定蛋白質含量、
SDS-PAGE電泳法測定蛋
摘要 本實驗通過從小牛腸中提取小牛腸鹼性磷酸酶，利用考馬斯亮藍法測定蛋白質含量，並測定酶的活性。最後通過SDS-聚丙烯凝膠電泳測定蛋白質相對分子量.
關鍵詞 小牛腸鹼性磷酸酶提取 酶活測定 考馬斯亮藍法 SDS-PAGE電泳法
本實驗分為三部分。先通過對牛小腸內膜的刮取，離心，沉澱析出等方法，提取牛小腸鹼性磷酸酶；然後用考馬斯亮藍G-250與鹼性磷酸酶結合，利用紫外分光光度計在一定波長下測定結合物的吸收波長，根據其吸光度與蛋白質結合物的含量成正比的關係測定蛋白質含量，進而測定出蛋白質的比活力；最後，通過SDS-聚丙烯凝膠電泳測定蛋白質相對分子量，分析所獲得的電泳結果來推算出被測蛋白質分子量的近似值。
1 實驗部分
1.1 試劑與儀器
1.1.1小牛腸鹼性磷酸酶的提純及酶活測定
1、 試劑
（1）正丁醇、丙酮（置-20℃冰箱保存）
（2）1mol/L醋酸（HAC）、1mol/LNaOH、硫酸銨
（3）平衡緩衝液：0.01mol/LTris-HCL,PH 8.0,(含1.0×10-3mol/LMgCl2和1.0×10-5mol/LZnCl2)。
（4）底物緩衝液：1mol/L二乙醇胺-鹽酸緩衝液（PH9.8，含0.5×10-3mol/LMgCl2）。
（5）酶的底物溶液：用底物緩衝液配製15×10-3mol/L對硝基苯磷酸二鈉溶液。（已加入底物緩衝液中）
2、儀器
勻漿機、冷凍離心機、恆温水浴、紫外可見分光光度計、離心管、剪刀、載玻片、不鏽鋼盤、搪瓷盤、濾布、漏斗、分液漏斗、量筒、燒杯、移液槍、比色皿
1.1.2考馬斯亮藍法測定蛋白質含量
1、試劑
考馬斯亮藍、實驗小牛腸鹼性磷酸酶的提純及酶活測定所得酶液、生理鹽水
2、儀器
分光光度計、分析天平、玻璃比色杯、試管及試管架、移液槍
1.1.3 SDS-PAGE電泳法測定蛋白質相對分子質量
1、試劑
1）30%丙烯酰胺（acrylamide,Acr）置棕色瓶。
2）分離膠緩衝液：1.5mol/LTris-HCL緩衝液，pH8.8，已加入10%SDS。
3）濃縮膠緩衝液：0.5mol/LTris-HCL緩衝液，pH6.8，已加入10%SDS。
4）10%過硫酸銨（AP）（小離心管裝，提供驅動丙烯酰胺和雙丙烯酰胺的聚合所必須的自由基，須新鮮配置。）
5）TEMED（四甲基乙二胺）（小離心管裝T，通過催化過硫酸銨形成自由基而加速丙烯酰胺和雙丙烯酰胺的聚合）
6）上揚緩衝液（小離心管裝S）：稱100mgSDS、2mg溴酚藍、2g甘油，加0.1mL巰基乙醇、2mL-。-5mol/LpH8.0Tris-HCL,加超純水定容至10mL。
7）染色液：配置含0.1%考馬斯亮藍R250,40%（體積分數）甲醇和10%（體積分數）冰醋酸的染色液500mL，過濾後備用。
8）脱色液：500mL10%（體積分數）甲醇和10%（體積分數）冰醋酸的脱色液1000mL。
9）電泳緩衝液（含0.1%SDS，0.05mol/LTris，0.384mol/L甘氨酸pH8.3）.
2、儀器
電泳儀、電泳槽、制膠板、搖牀、移液槍
1.2 實驗過程
1.2.1小牛腸鹼性磷酸酶的提純及酶活測定
1、酶的分離提純
1）取新鮮小牛腸，用剪刀縱向剖開，用載玻片颳去小腸內粘膜，放到盤子一角。
2）統一將小腸黏膜液集中倒入勻漿機中，加1.5倍體積冰冷蒸餾水，高速勻漿15s，重複20次。
3）緩慢加入（總體積）1倍體積的冰冷正丁醇，高速勻漿15s，重複20次。
每組領取60mL的勻漿液，放入離心管中（離心管裝液量不能超過70%），用另一離心管用水配平（切記離心前連同離心管蓋子一起用天平配平），在4℃條件下，10000rpm，離心15min（離心管對稱放置）。
4）用濾布過濾去除雜質（濾餅），倒入分液漏斗中，靜止分層（勿搖），去下層水相，用1mol/LHAc調pH到
4.9。4℃，10000rpm，離心10min。
5）得到上清26.5mL，放入離心管中，用1mol/LNaOH調pH至6.5，稱取質量為溶液體積5%的硫酸銨1.33g(5g硫酸銨/100mL溶液)，加到離心管中溶解；再加0.47倍體積（12.45mL）冰冷丙酮，混勻，4℃（冰箱中）靜置30min以上。4℃，10000rpm，離心10min。
6）上清液36.5mL中加入1.07倍體積（39.06mL）冰冷丙酮，4℃靜置30min以上。4℃，10000rpm，離心10min。
7）取沉澱溶於2mL平衡緩衝液至全部溶解。置冰箱保存待用。
2、底物處理
底物（對硝基苯磷酸二鈉已溶於平衡緩衝液中）37℃水浴5min（注意：根據分光光度計使用情況，要檢測前加熱）
3、酶活檢測
1）將酶稀釋10倍（配製取10μL，溶於90μL平衡緩衝液中得到）
2）紫外分光光度計檢測條件：405nm波長，測定時間60s，取值2s，記錄範圍0.0-1.5。
3）取2個2mL比色皿（0.5cm光程），加入1.5mL上述（2）加熱的底物緩衝液，校對歸零。
4）將稀釋10倍的酶液10μL加到其中1個比色皿中（儀器外側），用手堵住皿口。快速上下倒2次，放回分光光度計中，測定沒動力學曲線。
1.2.2考馬斯亮藍法測定蛋白質含量
1、玻璃試管中加入5mL考馬斯亮藍。
2、在1.5mL離心管中，取上一實驗得到的酶液分別稀釋50、100、200倍。
3、各取100μL加入到5mL考馬斯亮藍試管中，混勻，反應5min以上，另各取100μL生理鹽水分別加入到5mL考馬斯亮藍試管中。（觀察藍色，以淺藍色為好）
4、紫外分光光度計檢測條件：595nm波長
5、取2個比色皿（1cm光程）加入考馬斯亮藍（比色皿的2/3），分光光度計中校對歸零。
6、將樣品放入外側比色皿中，讀吸光值（得到醫治蛋白濃度標準曲線範圍內的度數即可，0.1-0.5之間）。
7、根據蛋白濃度標準曲線，計算酶蛋白濃度（乘以相應稀釋倍數即得原始酶液蛋白濃度，注意單位）
1.2.3 SDS-PAGE電泳法測定蛋白質相對分子質量
1、裝板：將垂直板型電泳的玻璃片洗淨、晾乾；放好膠條（稜朝上，平鋪），用夾子夾好玻璃板，上面插上梳子（注意下面2個夾子要水平，兩側夾子離梳子底部1-0.5cm，表明分離膠加的位置），垂直放置在水平台面上
備用。
2、製備分離膠：在小燒杯中按下表配置所需濃度的分離膠。
分離膠製備（濃度10%，製備量10mL）
試劑
H2O 30%丙烯酰胺
1.5mol/LTris-HCL緩衝液pH8.8
10%過硫酸銨
TEMED 用量 4.1mL 3.4mL 2.4mL 100μL 10μL
注意：最後加入TEMED，應快速搖勻分離膠，向玻璃板間隙，沿着長玻璃板的內側緩慢注膠，然後再用移液槍慢慢移動注入乙醇200μL，以防止氧氣進入膠內。15min後，分離膠和乙醇之間出現分界線，表明分離膠凝固，倒出乙醇。
3、製備凝縮膠：在小燒杯中按下表配置所需濃度的濃縮膠。
濃縮膠製備（濃度5%，製備量6mL）
試劑
H2O 30%丙烯酰胺
0.5mol/LTris-HCL緩衝液pH6.8
10%過硫酸銨
TEMED
進入氣泡，放置約20min，待濃縮膠凝固。
4、蛋白質樣品處理（小離心管裝B）：在1.5mL離心管中按1:1體積比例，加樣品和上樣緩衝液（200μL:200μL）。100℃加熱3min使蛋白變性。
5、濃縮膠完全聚合後，去掉夾子和膠條，拔去梳子（注意不要產生氣魄，即電泳泳道），將凝膠玻璃板固定於電泳裝置內槽上，加入電泳緩衝液（內、外槽，查漏），緩衝液高過玻璃板凹面。
6、用移液槍依次在泳道加樣(5個20μL，4個40μL)。（本組將marker置於第六泳道）
7、電泳：連接正、負極，打開電源（穩壓130V或電流50-60mA），開始時，電流控制在40A，樣品進入分離膠後，緩慢升高電壓至140V或電流50-60mA保持電壓或電流強度不變。帶溴酚蘭指示劑遷移至下沿處，停止電泳，需1.5h左右。
8、剝膠染色：電泳結束後，取出凝膠玻璃板，用水沖洗，用金屬片從玻璃兩側輕輕撬開。使板內進入空氣，同時用水沖洗，取出凝膠板，將剝離下來的凝膠用水漂洗，轉入染色缸中。加染色液，至搖牀染色15min。
9、脱色：染色完畢，回收染色液，用水漂洗，加入脱色液，置搖牀脱色，30min換1次脱色液，脱色至背景清晰。
10、觀察測定蛋白的遷移率及條帶，對照標準樣品，分析蛋白樣品的分子量及純度。
11、拍照電泳結果，用於完成實驗報告。
用量 3.4mL 1.0mL 1.5mL 60μL 8μL 注意：一旦加入TEMED，應快速搖勻濃縮膠，在已凝固的分離膠層上加濃縮膠，立即將梳子插入膠液頂部，避免
2 結果與討論
2.1 小牛腸鹼性磷酸酶的酶活測定
鹼性磷酸酶酶活定義：在37℃條件下，以每分鐘催化水解1μmol底物的酶量為一個酶活力單位。
鹼性磷酸酶作用於緩衝液中的對硝基苯磷酸二鈉，使之水稀釋放出對硝基苯酚，後者在405nm光波長下有最大吸收，通過測定吸光值的變化率，可測知酚的生成量，從而計算出酶的活性單位。
酶活力的計算：
比活力（U/mg）= ΔA/min×VR×DE405×VE×C×L
1、由實驗小牛腸鹼性磷酸酶的提純及酶活測定中實驗步驟可知，
反應液的體積VR= 1.5mL
稀釋倍數 D= 10
405nm波長下對硝基苯酚的摩爾消光係數E405= 18.3L/(mol×cm)
所加酶液體積VE= 0.01mL
比色皿光程 L= 0.5cm
2、405nm波長下的吸光值的變化率通過分光光度計測量得到酶動力學曲線（圖1）可以得到，ΔA/min=0.6179 (根據圖片，自己估算斜率，注意單位。)
/看後刪除
説明： 圖片均要用自己的。
半欄圖片寬為8.15釐米，高為4.4~5.5釐米之間，對於特別大的圖可加大寬度。通欄圖片寬度為16.3釐米，高為4.4~5.5釐米之間，圖説為字號為小5號黑體字。
/
表注用小5號字，表字用6號字。
圖1.酶動力學曲線
3、蛋白質原始濃度C可由實驗考馬斯亮藍法測定蛋白質含量獲得
考馬斯亮藍G-250測定蛋白質含量屬於燃料結合法的一種。在一定蛋白濃度範圍內（0.01-1.0mg/mL）,蛋白質-色素結合物在
595nm
波長下的光吸收與蛋白質含量成正比，故可用於蛋白質的定量測量。
通過實驗，利用紫外分光光堆積測定稀釋50倍的酶液讀得吸光值為0.1478A，利用考馬斯亮藍常量法測蛋白質標準曲線（圖2）及其標準曲線擬合解析式y=0.697x-0.007得稀釋後的標準蛋白濃度為0.2221mg/mL。
故蛋白質原始濃度C=50×0.2221mg/mL=11.105mg/mL